BTX ECM 399電穿孔儀
適用于動植物、細菌、酵母、哺乳動物、人類細胞(包括活體細胞)的轉基因等操作,操作方法可參照相關文獻,及向廠商索要。ECM399轉基因儀主要用于哺乳動物轉染、細菌酶轉化,具有脈沖長、磁場強為其特點。
BTX ECM 399電穿孔儀應用舉例
高壓型用于:DNA或誘變等大腸桿菌結構轉基因
低壓型用于轉染、淋巴、髓膠質成纖維和COS-7細胞
無論任何一種哺乳動物細胞均可選擇不同的電壓和脈沖范圍,并且脈沖可隨時調整
細菌/酵母轉化(系統:ECM399/630)
電穿孔現在被認作是轉化細菌及酵母的的方法。革蘭氏陰性細菌(例如大腸桿菌)一般比革蘭氏陽性細菌更容易轉化,因為他們的細胞壁組成不同。對于革蘭氏陰性細菌常常可以獲得10的10次方轉化2/微克DNA的轉化效率,而對于革蘭氏陽性細菌,一般可以得到10的6次方轉化2/微克DNA。Chang等人(1997)成功對一個mtz-敏感的Heliobacterpylori菌株進行電穿孔以傳遞mtz抵抗性。Planelles等人(1999)使用電穿孔轉化大腸桿菌,以避免使用包裝物質。最近電穿孔儀器方面的進展將使研究人員能夠進一步優化細菌轉化(例如脈沖長度產生方面擴展的功能條件)。
RNA、DNA、蛋白質以及小分子都已經通過電穿孔的方法轉入酵母。沒有必要在電穿孔前部分去除酵母細胞壁,因為在完整酵母電穿孔方面的進展可以產生高的轉化率。Faber等人(1994)年優化了S.Cerevisiae的實驗方案,使用HansenulaPolymorpha獲得了比以前的報告增加300倍的轉化效率。
在質粒修復中,質粒從酵母轉入大腸桿菌以進行詳細的DNA序列分析,這是另外一種重要的技術。這種兩個步驟的過程被電穿孔進行了簡化,用于驗證隱性基因的結構,將其導入酵母,看基因性和表現性之間的關系。已經建立了標準的實驗方案使用指數衰減波發生器例如BTXECM630轉化細菌/酵母。使用方形波電穿孔儀的實驗方案,例如BTXECM830,來轉化細菌/酵母。研究人員還成功將大的質粒(BAC及YAC)導入細菌。電穿孔杯是細胞及酵母電穿孔的附件,而Model747共軸電極使用則變得越來越普遍。
BTX ECM 399電穿孔儀技術參數
高壓模式 | 電壓 | 10-2500V,10V調進 |
電阻 | 150Ω | |
電容 | 36μF | |
低壓模式 | 電壓 | 2-500V,2V調進 |
電阻 | 151Ω | |
電容 | 1050μF |
留言注意事項: